Show Menu
Cheatography
  1. Home >
  2. Education >

Labordiagnostische Methoden bei Geflügel Cheat Sheet (DRAFT) by

Labordiagnostik für die Hühner, also EPA 3 basically

This is a draft cheat sheet. It is a work in progress and is not finished yet.

Serologie Overview

Antikö­rpe­rprofil für die Überwa­chung der Herde
Stichprobe muss groß genug sein
aoft gepaarte Serump­roben im Abstand von 2 bis 4 Wochen nach Krankh­eit­sau­sbruch
deutli­cher, möglichst vierfacher Titera­nstieg

ELISA

enzyme linked immuno­sorbent assay
Nachweis von AK durch Bindung an Antigene, welche an eine Mikrot­ite­rplatte gebunden sind
durch enzymg­eko­ppelten Sekund­ära­nti­körper kann eine Reaktion sichtbar gemacht werden
kann auch modifi­ziert werden, um stattd­essen Antigene nachzu­weisen
Vorteile: Automa­tis­ierung der Schritte möglich, kann vom Computer ausgew­ertet werden, viele Pathogene haben schon eigene ELISA Nachwe­iss­ysteme
Refere­nzseren sollten immer mit eingeb­unden werden
graphische Darste­llung der ELISA Daten erfolgt durch die Auftragung der optischen Dichte gegen den Logari­thmus der Konzen­tra­tion, sodass die entste­hende Kurve eine sigmoidale Form aufweist

Agarge­lim­mun­dif­fus­ion­stest

Präzip­ati­ons­linien entstehen durch die Intera­ktion von diffun­die­renden AK und AG
auf dem Agar sieht man feine Linien bei einem positivem Ergebnis
Einfach- und Doppel­dif­fus­ion­stests

Hämagg­lut­ina­tio­nstest

Nachweis von hämagg­lut­ini­erenden Viren oder Bakterien und deren AK
Vernetzung von Erythr­ozyten in einer Mikrot­ite­rplatte als Reakti­ons­beh­ältnis
Antikörper können die Agglut­ination hemmen, sodass es zu einer Vernetzung der Erythr­ozyten kommt
 

Virusd­ete­kti­ons­met­hoden

für die Detektion muss zwischen vermeh­run­gsf­ähigem Virus, Virusa­nti­genen oder Virusgenom unters­chieden werden
vermeh­run­gsf­ähiges Virus ist meist nur in akuter oder subakuter Phase nachwe­isbar, also meist um die 14 Tage
in chroni­scher Phase können Virusa­ntigene und später nurmehr das Genom nachge­wiesen werden
im Elektr­one­nmi­kroskop ist eine Zuordnung der Isolate in Familien möglich

Anzucht im embryo­nierten Hühnerei

spezif­isc­h-p­ath­oge­nfreie Hühnereier
vorher muss das Vorhan­densein der AK im Ei ausges­chl­ossen werden
meistens Absterben der Embryonen oder Entwic­klu­ngs­def­ekten wie Verkrü­mmung
nach der Inkuba­tio­nszeit oder nach dem Absterben der Embryonen erfolgt die Unters­uchung auf Veränd­erungen wie Ödeme oder Blutungen in den Organen
oft mehrere Blindp­assagen notwending
versch­iedene Inokul­ati­ons­routen: Dotter­sack, Allant­ois­höhle, Chorio­all­ant­ois­membran und Amnion­höhle

Anzucht in der Zell- oder Organk­ultur

am häufigsten primären Zellen sind Hühner­emb­ryo­nen­fib­rob­lasten, Hühner­nie­ren­zellen und Hühner­leb­erz­ell­kul­turen
es gibt einige permanente Zelllinien (z.B Marekv­iru­s-i­ndu­zierte Tumorz­ell­linien) zur Anzucht von Viren
Nachweis durch mikros­kop­ische zytopa­thogene Effekte (Synzi­tie­nbi­ldung, ballon­ierende Effekte, Plaque­bil­dung) oder durch Errege­rna­chweis mittels AK